Incrustación

La microscopía de inclusión, también llamada inclusión histológica o de tejido, es una técnica utilizada en microscopía para preparar secciones delgadas de tejido biológico para su examen bajo un microscopio. Implica el proceso de incrustar el tejido en un medio sólido, como parafina o resina, para proporcionar soporte estructural y facilitar el corte de la sección.

Aquí se ofrece una descripción general del proceso de microscopía de incrustación:

1. Fijación del tejido: la muestra de tejido se fija primero con una solución fijadora para mantener su estructura y evitar la degradación. Los fijadores comunes son el formaldehído o el paraformaldehído.
2. Deshidratación: el tejido fijado se deshidrata pasándolo por una serie de soluciones alcohólicas de concentraciones crecientes. Este proceso elimina el agua del tejido y lo prepara para la infiltración con el medio de inclusión.
3. Aclaramiento: después de la deshidratación, el tejido se aclara con un disolvente orgánico, como xileno o tolueno. Este paso elimina el alcohol del tejido y permite una mejor penetración del medio de inclusión.
4. Infiltración: Luego, el tejido se sumerge en el medio de inclusión, que puede ser parafina o un compuesto resinoso. El medio de inclusión reemplaza el disolvente limpiador, penetra en el tejido y proporciona soporte para el corte.
5. Inclusión: el tejido infiltrado se coloca en un molde con el medio de inclusión y se fija. En la inclusión de parafina, el molde se enfría para permitir que la cera se solidifique, mientras que la inclusión de resina requiere un proceso de curado.
6. Corte: una vez que el medio de inclusión se ha solidificado, se cortan secciones delgadas del tejido incluido usando un microtomo. . El micrótomo permite un corte preciso y consistente del tejido en rodajas, generalmente de varios micrómetros de espesor.
7. Montaje: las secciones se transfieren a portaobjetos de vidrio y se tratan para mejorar la adhesión. Para las secciones incluidas en parafina, la cera se elimina calentando, después de lo cual las secciones se montan y se cubren con un medio de montaje. Las secciones incrustadas en resina pueden requerir pasos de procesamiento adicionales antes del montaje.
8. Tinción: después del montaje, las secciones se pueden teñir con varias técnicas para mejorar el contraste y revelar estructuras o componentes celulares específicos. Las técnicas de tinción comunes incluyen tinción con hematoxilina y eosina (H&E), inmunohistoquímica y tinciones especiales para propósitos específicos.
9. Análisis microscópico: las muestras preparadas se colocan bajo un microscopio, generalmente un microscopio óptico