La fijación en microscopía es un paso crucial en la preparación de muestras de tejido para su examen bajo el microscopio. El propósito de la fijación es mantener la estructura del tejido, detener la actividad enzimática y prevenir la degradación de los orgánulos y proteínas celulares. La fijación garantiza que se preserven la arquitectura del tejido y la relación entre los diferentes componentes celulares.
Existen diferentes métodos y dispositivos de fijación que se pueden utilizar, según el tipo de tejido y el examen previsto. Algunos fijadores comúnmente utilizados son:
- Formaldehído: el formaldehído, en forma de solución como la formalina, es un fijador de uso común. Reacciona con proteínas en el tejido y forma enlaces covalentes para mantener la estructura.
- Glutaraldehído: el glutaraldehído es un fijador utilizado principalmente para microscopía electrónica. Proporciona una mejor conservación de los orgánulos y ultraestructuras celulares.
- Solución de Bouin: La solución de Bouin es un fijador utilizado para tejidos específicos como los tejidos embrionarios. Contiene una combinación de formaldehído, ácido acético y ácido pícrico.
- Etanol: el etanol se utiliza a menudo para la deshidratación y fijación de frotis citológicos finos. Preserva las estructuras celulares y previene la contracción celular.
El proceso de fijación generalmente implica los siguientes pasos:
- Preparación de la muestra: la muestra de tejido se recolecta y coloca cuidadosamente en el corte deseado o rebanado para darle forma, según el estudio previsto.
- Adición del fijador: la muestra de tejido se sumerge en el fijador, generalmente en forma líquida, como una solución fijadora. La muestra debe estar completamente cubierta con el fijador.
- Tiempo de fijación: la muestra se deja en el fijador durante un período de tiempo, que suele oscilar entre varios minutos y varias horas, según el tipo de tejido y el fijador. .
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- Enjuague: después de la fijación, la muestra de tejido se enjuaga minuciosamente para eliminar el exceso de fijador. Esto generalmente se hace con un agente de enjuague adecuado, como una solución tampón.
Después de la fijación, la muestra de tejido se puede procesar para análisis posteriores, como incrustación en parafina o resina, corte fino secciones con un micrótomo y tinción para observación microscópica.
La fijación es un paso crítico para mantener la integridad del tejido y obtener resultados precisos en el examen microscópico. Garantiza que se conserven las estructuras del tejido y que los componentes deseados se visualicen correctamente bajo el microscopio.
