Fissazione

La fissazione al microscopio è un passaggio cruciale nella preparazione dei campioni di tessuto per l'esame al microscopio. Lo scopo della fissazione è mantenere la struttura del tessuto, arrestare l'attività enzimatica e prevenire la degradazione degli organelli cellulari e delle proteine. La fissazione garantisce che l'architettura del tessuto e la relazione tra i diversi componenti cellulari siano preservati.

Esistono diversi metodi e dispositivi di fissazione che possono essere utilizzati, a seconda del tipo di tessuto e dell'esame previsto. Alcuni fissativi comunemente usati sono:

1. Formaldeide: la formaldeide, sotto forma di soluzione come la formalina, è un fissativo comunemente usato. Reagisce con le proteine nel tessuto e forma legami covalenti per mantenere la struttura.
2. Glutaraldeide: la glutaraldeide è un fissativo utilizzato principalmente per la microscopia elettronica. Fornisce una migliore conservazione degli organelli cellulari e delle ultrastrutture.
3. Soluzione di Bouin: la soluzione di Bouin è un fissativo utilizzato per tessuti specifici come i tessuti embrionali. Contiene una combinazione di formaldeide, acido acetico e acido picrico.
4. Etanolo: l'etanolo viene spesso utilizzato per la disidratazione e la fissazione di strisci citologici sottili. Preserva le strutture cellulari e previene il restringimento cellulare.

Il processo di fissazione prevede solitamente i seguenti passaggi:

1. Preparazione del campione: il campione di tessuto viene raccolto e posizionato con cura nel taglio desiderato o affettato nella forma desiderata, a seconda dello studio previsto.
2. Aggiunta del fissante: il campione di tessuto viene immerso nel fissativo, solitamente in forma liquida come una soluzione fissativa. Il campione deve essere completamente ricoperto dal fissativo.
3. Tempo di fissazione: il campione viene lasciato nel fissativo per un periodo di tempo, solitamente compreso tra alcuni minuti e diverse ore, a seconda del tipo di tessuto e del fissativo .
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5. Risciacquo: dopo la fissazione, il campione di tessuto viene accuratamente risciacquato per rimuovere il fissativo in eccesso. Questo di solito viene fatto con un agente di risciacquo adatto, come una soluzione tampone.

Dopo la fissazione, il campione di tessuto può essere trattato per ulteriori analisi, come l'inclusione in paraffina o resina, il taglio sottile sezioni con microtomo e colorazione per l'osservazione al microscopio.

La fissazione è un passaggio fondamentale per mantenere l'integrità dei tessuti e ottenere risultati accurati all'esame microscopico. Garantisce che le strutture dei tessuti siano preservate e che i componenti desiderati siano correttamente visualizzati al microscopio.